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2022-613
WINSERA胎牛血清為什么要熱滅活血清?有必要做熱滅活嗎?加熱可以滅活血清中的補(bǔ)體系統(tǒng)，使補(bǔ)體去活化。通常未滅活的補(bǔ)體能夠刺激平滑肌收縮、肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放、激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，同時(shí)還能夠參與溶解細(xì)胞的過程。諸多研究表明大多數(shù)細(xì)胞的培養(yǎng)無須進(jìn)行血清的熱滅活；而在免疫學(xué)研究和ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)過程中，推薦使用熱滅活血清。實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)正確熱滅活處理的血清，對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)或*沒有促進(jìn)作用，而通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，造成細(xì)胞生長速...
查看更多2022-610
細(xì)胞生長逐漸變慢是什么原因？細(xì)胞增殖變慢有以下原因：1.消化過度2.傳代過密3.細(xì)胞營養(yǎng)不良4.細(xì)胞頻繁傳代5.細(xì)胞狀態(tài)不佳或老化6.細(xì)胞存在污染。培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5%或10%CO2？一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10%CO2；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時(shí)，則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。CO2培養(yǎng)箱之水盤...
查看更多2022-610
培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點(diǎn)，是污染嗎？首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁，如果變渾濁，基本可以確定是污染；如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁：在顯微鏡下觀察黑點(diǎn)大小和形狀是否規(guī)則，是否運(yùn)動(dòng)，是做布朗運(yùn)動(dòng)還是呈直線型快速移動(dòng)。如果黑點(diǎn)大小不規(guī)則，做布朗運(yùn)動(dòng)，黑點(diǎn)可能是細(xì)胞碎片（可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的），也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的，也可能是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點(diǎn)大小一致，快速移動(dòng)，很可能是細(xì)菌污染。如何預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)中黑點(diǎn)的產(chǎn)生?掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī)，不要細(xì)胞長老了再...
查看更多2022-610
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過程對細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久。細(xì)胞抱團(tuán)怎么處理？一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長是正常現(xiàn)象，大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下，很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長的現(xiàn)象，聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細(xì)胞，因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)...
查看更多2022-69
胎牛血清品質(zhì)的正確認(rèn)識(shí)1）胎牛血清是品質(zhì)高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分最少；2）應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛，新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛；3）由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清的解凍正確方法胎牛血清的正確存放與解凍是各位實(shí)驗(yàn)家尤為關(guān)注的一個(gè)問題，在保證質(zhì)量的前提下...
查看更多2022-66
ELISA試劑盒常見問題01問：看說明書里，如果樣本濃度高，可以不用稀釋，直接加原液。這個(gè)直接加血清原液，你們自己親自做過嗎？因?yàn)橹拔覀冇脛e家的，他們說明書里，加樣是：10微升樣品加40微升樣品稀釋液。咨詢他們?nèi)绻绻麧舛雀撸梢约釉簡?？他們說可以，可能他們沒做過，說可以。可我們做了，不可以。問他們，又說是可能離子濃度不夠。答：ELISA試劑盒檢測范圍是固定的，樣本是否稀釋是根據(jù)樣本實(shí)際濃度來選擇的，但前提條件樣本要落在檢測范圍內(nèi)，濃度高于檢測范圍，稀釋樣本達(dá)到檢測范圍內(nèi)...
查看更多2022-66
固體樣本處理問題01組織樣本操作流程：1、組織樣本必須保持鮮重，如果是凍存的組織，應(yīng)該室溫平行2小時(shí)以上，然后用生理鹽水沖洗干凈，再用濾紙把周圍的水分吸干，稱重！組織重量不能低于50mg。2、組織勻漿液選取是PBS（PH=7.2-7.4，濃度為0.01mol/L）勻漿的比例為1:10，相當(dāng)于1g組織加9ml的勻漿液。3、組織勻漿后，離心取上清，離心轉(zhuǎn)數(shù)為5000轉(zhuǎn)，但不能超過5000轉(zhuǎn)，時(shí)間為15分鐘。4、實(shí)驗(yàn)中老師樣本提取的是200mg的樣本加1.8ml的勻漿液。02土壤樣...
查看更多2022-66
細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是是什么?如何處理?1.一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：(1)細(xì)胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘??；(2)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長；(3)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可...
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