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血清保存方法和凍融方法

血清保存方法1.如何保存血清？血清應(yīng)該在-20℃保存。如果一次無(wú)法用完一瓶，應(yīng)該無(wú)菌分裝后冷凍保存。注意避免反復(fù)凍融。2.為什么儲(chǔ)存在冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀？有些胎牛血清產(chǎn)品沒(méi)有預(yù)老化，儲(chǔ)存在2－8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。這應(yīng)該不會(huì)影響血清的質(zhì)量。推薦在－20℃儲(chǔ)存胎牛血清，避免反復(fù)凍融。凍融方法正確解凍方法：將血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小時(shí)，使之緩慢部分溶解，然后再放在室溫下使之全溶。注...

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胎牛血清與新生牛血清、小牛血清區(qū)別

胎牛血清與新生牛血清、小牛血清區(qū)別1.血清類(lèi)別牛血清類(lèi)別胎齡胎牛血清（FBS)胎兒(母牛懷孕3-8個(gè)月)新生牛血清(NCS)出生10日內(nèi)小牛血清（BCS）16-22周供體血清成年牛2.采血方式不同胎牛血清：母牛懷孕3-8個(gè)月時(shí)，采用剖腹心臟密閉穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供體牛血清：分別是取自新生牛（小牛）、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清還未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少；促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促帖附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分也不同于其他幾類(lèi)血清4....

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胎牛血清給細(xì)胞提供的6大益處

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用需要的添加培養(yǎng)基。它營(yíng)養(yǎng)豐富，大約含有三四百種不同成分，具有基礎(chǔ)培養(yǎng)基所不具備的營(yíng)養(yǎng)因子。一、在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中胎牛血清的好處胎牛血清給細(xì)胞提供的益處主要體現(xiàn)在6個(gè)方面：1、提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然激素或天然的生長(zhǎng)因子。2、提供天然的結(jié)合蛋白，能識(shí)別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和激素等，能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白(albumin）即具有上述功能，并對(duì)細(xì)胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白（Fetuin），具有多個(gè)鈣離子結(jié)...

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千舍——WinSera系列胎牛血清如何選擇？

對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)而言，胎牛血清的重要性不言而喻。胎牛血清既是讓細(xì)胞快樂(lè)成長(zhǎng)的需要營(yíng)養(yǎng)物，又是可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡的“原因”。辛苦養(yǎng)起來(lái)的細(xì)胞可能因?yàn)樘ヅＱ逵缅e(cuò)而一切歸零……那么胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)最關(guān)鍵的原料之一，胎牛血清的質(zhì)量直接決定培養(yǎng)細(xì)胞的成敗，千舍生物為各科研人員推薦以下幾款血清：一、干細(xì)胞專(zhuān)用胎牛血清（低內(nèi)毒素FBS500-WE-002(ES)）千舍生物嚴(yán)格控制胎牛血清的來(lái)源，做好檢驗(yàn)檢疫與溯源等工作，心臟穿刺采血低溫分離，3次0.1μm無(wú)菌過(guò)濾，內(nèi)毒素≤3EU/ml，可...

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細(xì)胞計(jì)數(shù)方法

原理：當(dāng)待測(cè)細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時(shí)，通過(guò)測(cè)定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目即可換算出每mL細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量。操作步驟：1.將計(jì)數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈，并將蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)板上；2.輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞均勻分布；吸出少許細(xì)胞懸液滴在細(xì)胞入口，使細(xì)胞懸液充滿(mǎn)蓋玻片和計(jì)數(shù)板之間，靜置1-2min，使細(xì)胞沉降；注意蓋玻片下不要有氣泡，也避免細(xì)胞懸液進(jìn)入旁邊的槽中；3.在顯微鏡下對(duì)A/B/C/D四個(gè)大格內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，壓在大格四周邊線(xiàn)上的細(xì)胞只計(jì)數(shù)壓在2條邊線(xiàn)上的細(xì)胞（如右側(cè)和下方...

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細(xì)胞傳代操作步驟如何

一、貼壁細(xì)胞傳代（以一個(gè)T25瓶為例）1、吸出原培養(yǎng)液；2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞，吸出PBS丟棄；3、加入1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞，放入培養(yǎng)箱消化；4、消化時(shí)間跟據(jù)細(xì)胞特性有所不同，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯分離變圓，側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以滑落時(shí)可終止消化，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫落并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞，使之盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液，這時(shí)可以在顯微鏡看下；6、收集細(xì)胞懸液離心，1...

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如何避免細(xì)胞污染，千舍有妙招

1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，并開(kāi)啟超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10min再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。2.實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái)，以利于空氣的流通；實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。3.每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。4.操作時(shí)小心取用無(wú)菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開(kāi)的容器瓶口正上方操作，容...

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胎牛血清的內(nèi)毒素含量多少為宜？

有下列情況者，對(duì)血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選：1.養(yǎng)干細(xì)胞時(shí)，干細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感，如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時(shí)，干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者，在血清在試用前，就通過(guò)提早審核該批次《檢測(cè)報(bào)告》，以決定是否入圍進(jìn)行試用。2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時(shí)，過(guò)高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子，抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài)，任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑，都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘，謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時(shí)，選擇極低的內(nèi)毒...

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